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	<title>Contaminación &#8211; microBIOblog</title>
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	<description>Noticias y curiosidades sobre virus, bacterias y microbiología</description>
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		<title>Los hospitales: un inmenso planeta de microbios</title>
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		<dc:creator><![CDATA[Ignacio López-Goñi]]></dc:creator>
		<pubDate>Sat, 27 May 2017 14:59:00 +0000</pubDate>
				<category><![CDATA[General]]></category>
		<category><![CDATA[Contaminación]]></category>
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					<description><![CDATA[&#160;¿Por qué ocurren infecciones hospitalarias por bacterias&#160; resistentes a los antibióticos? Según datos del ECDC, cada año más de 4 millones de pacientes pillan una infección hospitalaria en la Unión Europea. El número de muertos que ocurren como consecuencia directa de estas infecciones se estiman en unos 37.000, pero además estas infecciones pueden contribuir con otras 110.000 muertes más cada año. En España, seis de cada 100 enfermos que ingresan en un centro hospitalario salen con una infección que no tenían cuando entraron. La mayoría son infecciones urinarias o respiratorias, pero también pueden ser infecciones después de una operación, infecciones]]></description>
										<content:encoded><![CDATA[<p><strong><o:p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">&nbsp;</span></o:p></strong><em><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">¿Por qué ocurren infecciones hospitalarias por bacterias&nbsp;</span></em></p>
<p><em><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">resistentes a<br />
los antibióticos?</span></em></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Según datos del <a href="http://ecdc.europa.eu/en/healthtopics/healthcare-associated_infections/pages/index.aspx" target="_blank" rel="noopener">ECDC</a>, cada año más de 4 millones de<br />
pacientes pillan una infección hospitalaria en la Unión Europea. <strong>El número de muertos que ocurren como<br />
consecuencia directa de estas infecciones se estiman en unos 37.000</strong>, pero<br />
además estas infecciones pueden contribuir con otras 110.000 muertes más cada<br />
año. En España, seis de cada 100 enfermos que ingresan en un centro<br />
hospitalario salen con una infección que no tenían cuando entraron. La mayoría<br />
son infecciones urinarias o respiratorias, pero también pueden ser infecciones<br />
después de una operación, infecciones sanguíneas o incluso diarreas severas, y<br />
muchas están causadas por bacterias resistentes a los antibióticos. Se calcula<br />
que entre el 20-30% de estas infecciones hospitalarias puede prevenirse mediante<br />
programas de control y de higiene intensiva.</span></p>
</p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/Antibiograma2Bgigante.jpg" /></p>
</p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif; font-size: 12pt;">¿Por qué ocurren estas infecciones hospitalarias muchas de<br />
ellas por bacterias resistentes a los antibióticos? Se podría pensar que la<br />
razón es una mala práctica médica, negligencia de los profesionales<br />
biosanitarios o incluso suciedad del hospital. No podemos descartar esas<br />
razones y todo centro hospitalario deber tener unas estrictas medidas de<br />
higiene y limpieza y una política concreta de uso de antibióticos.</span></p>
<p align="center"><em><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">A pesar de la idea que tenemos de que un hospital es un lugar aséptico,<br />
la cantidad de microbios que puede albergar es impresionante<o:p></o:p></span></em></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Recientemente, un grupo de investigadores han estudiado <strong>cómo los microorganismos colonizan y se<br />
mueven por el ambiente de un hospital</strong> (1). Para ello, han analizado la<br />
diversidad bacteriana asociada a pacientes, personal sanitario y superficies en<br />
un hospital de nueva construcción de la Universidad de Chicago. La toma de<br />
muestras comenzó 2 meses antes de que se inaugurara el hospital y continuó<br />
durante todo un año. Se tomaron un total de 6.523 muestras de 10 habitaciones y<br />
dos controles de enfermas en dos plantas del hospital. Una de las habitaciones<br />
se muestreo diariamente, mientras que en los otros lugares la toma de muestras<br />
fue semanal. Todos las habitaciones se limpiaban de forma exhaustiva<br />
diariamente con lejía. Se tomaron muestras de 24 sitios distintos: varias<br />
partes de la piel de los pacientes y personal sanitario (nariz, axila, manos),<br />
y de la superficie de manillas de las puertas, teléfonos móviles, grifos, borde<br />
de la cama, buscapersonas de los médicos, guantes, mostrador del control de<br />
enfermeras, reposabrazos de las sillas, ratón del ordenador, suelos, filtros de<br />
aire, zapatos del personal, dobladillo de la camisa, etc. Como ves (casi) nada<br />
quedó fuera del alcance de los microbiólogos.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Los resultados fueron muy curiosos, … pero bastante lógicos<br />
para un microbiólogo. Por ejemplo, comprobaron que <strong>las bacterias dominantes cambiaron nada más inaugurar el hospita</strong>l.<br />
Mientras que antes de abrir el centro las bacterias dominantes en el suelo y<br />
las superficies eran <em>Acinetobacter</em> y <em>Pseudomonas</em><strong>, </strong>tan pronto como se abrió el hospital aumentó la abundancia<br />
relativa de bacterias asociadas a la piel humana, como <em>Corynebacterium, Staphylococcus </em>y <em>Streptococcus</em>. <o:p></o:p></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/Figura2B1.png" /></p>
<p><o:p></o:p></p>
<p align="center"><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Cambios en la<br />
abundancia relativa de cinco géneros bacterianos antes y después de la<br />
inauguración del hospital (1).<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Vieron que al ingresar, el paciente adquiere un aluvión de<br />
bacterias presentes en el suelo y paredes de la habitación, pero <strong>con el tiempo es la microbiota del paciente<br />
la que predomina en la habitación</strong>: se invierte el proceso y son las<br />
bacterias del paciente las que colonizan la habitación. El ambiente de la<br />
habitación también influye y una temperatura más alta y mayor iluminación se<br />
asocian con una mayor diferencia entre las bacterias del paciente y su habitación.<br />
Por el contrario, una humedad relativa más alta contribuye a que las<br />
microbiotas del paciente y de la superficie de la habitación sean más<br />
similares. La composición de bacterias de la piel del paciente y de las<br />
superficies de su habitación eran más similares conforme el tiempo de ingreso<br />
era mayor, <strong>más tiempo ingresado en la<br />
habitación, más se parece la composición de bacterias de la piel del enfermo y<br />
de su habitación</strong>.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">La menor diversidad bacteriana se encontró en las muestras<br />
de piel de pacientes y enfermeras, mientras que las muestras que interaccionan<br />
con el exterior como los<span style="mso-spacerun: yes;">&nbsp; </span>zapatos, los<br />
suelos y el aire fueron las más diversas. A diferencia de lo que ocurre con las<br />
muestras de pacientes, las bacterias de las manos del personal sanitario fue<br />
similar a las de las superficies, muy probablemente porque ellos se mueven por<br />
todo el hospital, mientras que el paciente suele estar “quieto parado” en su<br />
habitación. <o:p></o:p></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/Figura2B2.png" /></p>
<p><o:p></o:p></p>
<p align="center"><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Diversidad de<br />
bacterias en distintos tipos de muestras. La mayor diversidad microbiana se encontró<br />
en los zapatos, el suelo, el aire y el ratón del ordenador (1).<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Las bacterias de las manos de los paciente se parecía más a<br />
las obtenidas en el borde de su cama, mientras que las del personal sanitario<br />
eran parecidas a la de sus teléfonos móviles y buscapersonas. Curiosamente, <strong>la microbiota de la piel del personal<br />
sanitario se parece más entre si en los meses de verano y principio de otoño<br />
que en invierno</strong>. Quizá en invierno, como hace más frío, vamos más<br />
“tapadicos”, nos “rozamos” menos e intercambiamos menos bacterias. <span style="mso-spacerun: yes;">&nbsp;</span><o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">En este estudio también han analizado la frecuencia de genes<br />
de resistencia a los antibióticos entre las bacterias. En general, han<br />
descubierto mayor cantidad de este tipo de genes en las bacterias de las<br />
superficies y menor en las de la piel de los pacientes, con la excepción de <strong>los genes de resistencia al antibiótico<br />
tetraciclina que eran más abundante en las bacterias de la piel</strong>. De los 252<br />
pacientes que participaron en este estudio 20 adquirieron una infección<br />
hospitalaria, pero no necesariamente por bacterias del propio hospital, sino de<br />
bacterias que ya llevan en su interior antes del ingreso. <o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Hay que tener en cuenta además que <strong>un hospital es uno de los entornos más propicios para que ocurran<br />
infecciones por bacterias </strong>resistentes a los antibióticos, que pueden llegar<br />
a ser mortales. Te lo explico en cinco ideas:<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;"><strong>&#8211; la práctica médica<br />
es agresiva.</strong> Colocar un catéter, introducir una sonda, un respirador,<br />
intubar a un enfermo o abrirle las tripas en una operación suponen una grave<br />
agresión y ruptura de la primera barrera que tenemos contra la infección, la<br />
piel. La piel es una barrera muy efectiva para evitar la entrada de patógenos y<br />
al pincharnos o entubarnos permitimos la entrada de microbios y potenciales<br />
patógenos. <o:p></o:p></span></p>
</p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/cateter.jpg" /></p>
</p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;"><strong>&#8211; los enfermos tiene<br />
las defensas disminuidas.</strong> En un hospital hay enfermos y en general los<br />
enfermos suelen tener las defensas comprometidas. Otra infección o enfermedad o<br />
el mismo tratamiento suele llevar consigo una disminución de nuestro sistema<br />
inmune. Además, muchos de los pacientes pueden ser niños o personas ya mayores,<br />
con problemas inmunitarios.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;"><strong>&#8211; en un hospital se<br />
utilizan muchos antibióticos.</strong> Como hay gente enferma y con infecciones, el uso<br />
de antibióticos es una práctica común en un hospital. Y eso favorece la<br />
proliferación de las bacterias resistentes a los antibióticos que puede haber<br />
en el entorno. Por eso, los hospitales suelen tener su propia “política” de<br />
administración de antibióticos, para disminuir la aparición de resistencias. Por<br />
cierto, te recomiendo que visites la <strong>campaña<br />
de concienciación sobre el uso correcto de los antibióticos que hizo el<br />
Hospital La Paz</strong> de Madrid, con unas<a href="http://www.madrid.org/cs/Satellite?cid=1354487888965&amp;language=es&amp;pagename=HospitalLaPaz%2FPage%2FHPAZ_contenidoFinal" target="_blank" rel="noopener">imágenes super chulas</a>. <o:p></o:p></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/todos2Bcopia.png" /></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;"><strong>&#8211; las bacterias están<br />
en todas partes.</strong> Una de las conclusiones del trabajo anterior es que aunque<br />
no hay un patrón universal sobre cómo se mueven las bacterias por un hospital,<br />
los resultados sugieren que <strong>el personal<br />
sanitario es una fuente muy importante de las bacterias que nos encontramos en<br />
la piel de los pacientes</strong>. Además, el propio paciente es portador de<br />
bacterias, pero también el personal médico, enfermeras, celadores, personal de<br />
limpieza, las visitas, las personas con las que compartes la habitación, … en<br />
todos sitios hay bacterias, algunas muy resistente en el ambiente. Algunos han<br />
estimado que en tus manos puede haber más de 100 especies de bacterias<br />
distintas. <o:p></o:p></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/Mano2BOlivia2B2.jpg" /></p>
<p><o:p></o:p></p>
<p align="center"><em><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Esta es la mano de Olivia de dos añitos: colonias de bacterias<br />
obtenidas de la superficie de la mano.<o:p></o:p></span></em></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;"><strong>&#8211; las bacterias son muy<br />
promiscuas</strong> e intercambian genes entre ellas. Las bacterias, que están en<br />
todas partes y son muy numerosas, pueden intercambiar genes de virulencia y de<br />
resistencia a los antibióticos entre ellas, de forma que en un ambiente dónde<br />
hay antibióticos proliferan aquellas que llevan los genes de resistencia. <o:p></o:p></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2017/05/intercambio2Bgenes2Bbacterias.png" /></p>
<p><o:p></o:p></p>
<p align="center"><em><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Mediante distintos mecanismos (conjugación, transformación,<br />
transducción mediada por virus) las bacterias puede intercambiar su información<br />
genética.<o:p></o:p></span></em></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Por todo ello, podríamos decir que es <strong>casi imposible</strong> evitar estos casos de muertes hospitalarias por<br />
infecciones accidentales por bacterias resistentes a los antibióticos. Fíjate<br />
que cómo hemos dicho más arriba la ECDC estima que <strong>solo entre el 20-30% de estas infecciones podrían prevenirse </strong>mediante<br />
programas de control y de higiene intensiva. <o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Pero lo que sí podemos hacer es <strong>minimizar el problema</strong>. Y eso también está en tus manos, nunca mejor<br />
dicho. Te habrás fijando que en las puertas de las habitaciones de los<br />
hospitales suele haber unos botes con un gel para las manos. Se trata de una<br />
solución alcohólica bactericida, que mata las bacterias, y reduce la “carga”<br />
bacteriana de tus manos. Es muy recomendable (debería ser obligatorio) que <strong>cuando vayas a visitar a un enfermo o<br />
persona hospitalizada, antes de entrar, te laves bien las manos </strong>con esa<br />
solución, porque de esa forma podemos minimizar la proliferación de bacterias<br />
potencialmente peligrosas. <o:p></o:p></span></p>
<p align="center"><strong><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Si eres médico, enfermera o personal sanitario, no te olvides de lavarte las manos antes de entrar en la habitación<o:p></o:p></span></strong></p>
<p align="center"><strong><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Algo tan sencillo como lavarte las manos, … puede salvar una vida<o:p></o:p></span></strong></p>
<p align="center"><strong></strong></p>
<p align="center"><strong><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif;">Aquí te dejo con uno de los vídeos de #microBIOscope:&nbsp;</span></strong></p>
<p><iframe allowfullscreen="" class="YOUTUBE-iframe-video" data-thumbnail-src="https://i.ytimg.com/vi/AqT0KvsbMu0/0.jpg" frameborder="0" height="266" src="https://www.youtube.com/embed/AqT0KvsbMu0?feature=player_embedded" width="320"></iframe></p>
<p><span style="font-family: &quot;verdana&quot; , sans-serif; font-size: x-small;"><em>(1) Bacterial colonization and<br />
succession in a newly opened hospital. Simon, L., y col. (2017). Science<br />
Translational Medicine. 9(391): eaah6500&nbsp;</em></span><a href="http://stm.sciencemag.org/content/9/391/eaah6500" target="_blank" rel="noopener"><em>DOI: 10.1126/scitranslmed.aah6500</em></a></p>
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			</item>
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		<title>Microbios en la niebla: las bacterias que respiramos en las grandes ciudades</title>
		<link>https://microbioblog.es/microbios-en-la-niebla-las-bacterias</link>
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		<dc:creator><![CDATA[Ignacio López-Goñi]]></dc:creator>
		<pubDate>Sat, 15 Feb 2014 15:55:00 +0000</pubDate>
				<category><![CDATA[General]]></category>
		<category><![CDATA[Bacterias]]></category>
		<category><![CDATA[Contaminación]]></category>
		<category><![CDATA[Metagenómica]]></category>
		<category><![CDATA[Polución]]></category>
		<category><![CDATA[Virus]]></category>
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					<description><![CDATA[La contaminación de la atmósfera es un problema muy serio de salud pública. Ciudades como Pekín, con más de 20 millones de personas todas bien junticas, han tenido episodios de niveles de polución ambiental tan severos que incluso las autoridades han recomendado que niños y ancianos permanezcan en sus casas durante algunos días. Ese aire que respiramos está contaminado con cientos de sustancias químicas tóxicas, pero ¿qué microbios inhalamos esos días que hay una densa y sospechosa niebla de contaminación atmosférica? &#160;Hasta ahora para conocer qué microbios había en el aire se tomaban muestras de aire, se filtraban y se]]></description>
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<p><!--StartFragment--></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">La contaminación de la atmósfera es un problema muy serio de<br />
salud pública. Ciudades como Pekín, con más de 20 millones de personas todas<br />
bien junticas, han tenido episodios de niveles de polución ambiental tan<br />
severos que incluso las autoridades han recomendado que niños y ancianos<br />
permanezcan en sus casas durante algunos días. Ese aire que respiramos está<br />
contaminado con cientos de sustancias químicas tóxicas, pero <strong>¿qué microbios<br />
inhalamos esos días que hay una densa y sospechosa niebla de contaminación<br />
atmosférica?</strong></span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;"><strong><br />
</strong></span></p>
<p><img decoding="async" loading="lazy" src="https://microbioblog.es/wp-content/uploads/2014/02/Severe-smog-and-air-pollu-010.jpg" /></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;"><strong><br />
</strong></span></p>
<p><o:p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">&nbsp;</span></o:p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Hasta ahora para conocer qué microbios había en el aire se<br />
tomaban muestras de aire, se filtraban y se cultivaban, pero este método no<br />
permite detectar todos los microbios presentes en la atmósfera, porque muchos<br />
no son cultivables y no crecen en los medios de cultivo. Ahora, investigadores<br />
chinos han empleado técnicas de </span><strong>metagenómica</strong><span style="font-family: Verdana, sans-serif;"> (secuenciación masiva de todo el<br />
DNA presente en la muestra) para analizar la composición microbiana del aire<br />
que respiramos. Esta técnica nos permite incluso llegar a identificar los<br />
microbios a nivel de especie, y</span><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">&nbsp; </span><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">nos da<br />
una idea de los microorganismos que inhalamos o respiramos.</span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Tomaron 14&nbsp; muestras<br />
de aire en Pekín durante siete días consecutivos, a lo largo de una semana de<br />
enero de 2013, en el que la contaminación fue excepcionalmente alta. En algunos<br />
días la contaminación del aire fue 20 veces superior al limite recomendado por<br />
la OMS. Con unos filtros especiales obtuvieron las partículas y los microbios<br />
del aire, extrajeron el DNA total de las muestras, lo secuenciaron y lo<br />
compararon con las bases de datos.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Así, han identificado cerca de <strong>1.300 especies de microbios<br />
diferentes </strong>que están en el aire los días de mayor contaminación. <strong>La mayoría de<br />
los microbios son bacterias, arqueas y hongos asociados al suelo y que no son<br />
patógenos para el hombre</strong>. También detectaron virus con genoma DNA. La bacteria<br />
más frecuente de todas fue <em>Geodermatophilus<br />
obscurus</em>, que se encuentra normalmente en el suelo. También se encontraron<br />
<strong>algunos microbios que aparecen normalmente en las heces</strong>. Quizá el hecho de que<br />
en Pekín hay muy poca vegetación, mucho suelo expuesto y muchos sitios en construcción<br />
pudo influir en estos resultados.&nbsp; <o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Aunque en mucha menor proporción también se encontraron&nbsp; algunos microbios patógenos como <em>Streptococcus pneumoniae</em>, que puede<br />
llegar a causar neumonía,&nbsp;<em>Aspergillus fumigatus</em>, un hongo que está<br />
relacionado con las alergias y adenovirus humanos. Además, <strong>la frecuencia de estos<br />
patógenos aumentó 2-4 veces en los días con mayor polución</strong>, lo que puede ser un<br />
problema serio para los grupos más vulnerables, como personas mayores o con el<br />
sistema inmune más debilitado.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Puede sorprender que en este análisis no se detectaron virus<br />
que frecuentemente se trasmiten por el aire, como los rinovirus que causan<br />
catarros o virus de la gripe. La razón es que estos virus tiene su genoma del<br />
tipo RNA y la técnica empleada no permitía obtener suficiente muestras de RNA<br />
para analizar. Este trabajo puede ser muy interesante repetirlo en otros<br />
ambientes como los hospitales, donde la preocupación de que haya patógenos que<br />
se trasmiten por el aire es muy grande.<o:p></o:p></span></p>
<p><span style="font-family: Verdana, sans-serif;">Conclusión: en esos días de mucha niebla densa debida a la<br />
polución y contaminación ambiental puedes respirar microbios, la mayoría<br />
bacterias y hongos que normalmente están en el suelo y no son patógenos, otros<br />
que se encuentran frecuentemente en las heces (0_0) y algunos, muy pocos, que<br />
pueden causar enfermedades o alergias.</span><o:p></o:p></p>
<p><!--EndFragment--></p>
<p><span class="Z3988" style="font-family: Verdana, sans-serif; font-size: x-small;" title="ctx_ver=Z39.88-2004&amp;rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&amp;rft.jtitle=Environmental+science+%26+technology&amp;rft_id=info%3Apmid%2F24456276&amp;rfr_id=info%3Asid%2Fresearchblogging.org&amp;rft.atitle=Inhalable+Microorganisms+in+Beijing%27s+PM2.5+and+PM10+Pollutants+during+a+Severe+Smog+Event.&amp;rft.issn=0013-936X&amp;rft.date=2014&amp;rft.volume=48&amp;rft.issue=3&amp;rft.spage=1499&amp;rft.epage=507&amp;rft.artnum=&amp;rft.au=Cao+C%2C+et+al.&amp;rfe_dat=bpr3.included=1;bpr3.tags=Biology%2CMicrobiology"><em>Cao C, et al. (2014). Inhalable Microorganisms in Beijing&#8217;s PM2.5 and PM10 Pollutants during a Severe Smog Event. Environmental science &amp; technology, 48 (3), 1499-507 PMID: <a href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24456276">24456276</a></em></span></p>
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